[摘要] 研究马肾果叶的化学成分。采用硅胶、Sephadex LH-20、高效制备液相等方法，对马肾果甲醇提取物进行分离纯化，通过质谱（MS）、波谱数据分析（1H-，13C-NMR）进行结构鉴定。从马肾果甲醇提取物中分离7个化合物，分别鉴定为dasyclamide（1），aglamide A（2），aglamide B（3），aglamide C（4），aglamide D（5），aglaroxin A 1-O-acetate（6），3′-methoxyaglaroxin A 1-O-acetate（7）。上述化合物均为首次从该植物中分离得到。
[关键词] 米仔兰属；马肾果；化学成分
米仔兰属Aglaia植物全世界有300余种，主要分布于东南亚热带雨林地区，我国产7个种以及1个变种，主要分布于西南、南部至东南部地区[1]。米仔兰属的许多物种是传统的民间药物，有活血散瘀、消肿止痛、行气解郁的功效。国外学者对米仔兰属植物化学成分的研究较为广泛，化学成分主要包括木质素类、二酰胺类、黄酮类以及四环三萜类等成分[2-5]。研究表明，从该属植物中所分离得到的环戊四氢苯并呋喃（flavaglines）类化合物具有显著的抗肿瘤作用，是该属植物的特征成分[6-7]。
虽然米仔兰属植物为传统植物药，且其特有的flavaglines衍生物表现出显著的抗肿瘤活性，但在国内却缺乏相关的基础研究。因而，对国内米仔兰属植物的化学成分及其生物活性成分进行研究是一项非常有意义的工作，可藉此发现具有药理活性的前体化合物用于药物研制，开发具有自主知识产权的新型抗肿瘤药物。马肾果Aglaia testicularis C. Y. Wu为我国特有的米仔兰属植物，主要分布于云南东南部。目前，关于马肾果的化学成分的研究很少。为了进一步寻找新型天然抗肿瘤flavaglines类型的化合物，对马肾果的叶进行化学成分研究，从马肾果的甲醇提取物中初步分离得到7个化合物，分别鉴定为dasyclamide（1），aglamide A（2），aglamide B（3），aglamide C（4），aglamide D（5），aglaroxin A 1-O-acetate（6），3′-methoxyaglaroxin A 1-O-acetate（7），其中化合物（6）和（7）为flavaglines类型的化合物。这些成分均为首次从该植物中分离得到。
1 材料
Bruker DRX-500 MHz 核磁共振波谱仪（瑞士，TMS为内标）；Agilent Technonlgies 6520 质谱仪（美国），LABOROTA4000旋转蒸发仪（德国海道夫公司），Shimadazu LC-6AD制备型高效液相色谱仪（日本岛津公司），YMC ODS-A（20 mm× 250 mm，5 μm）色谱柱。
色谱用硅胶（青岛海洋化工厂）；Sephadex LH-20（美国GE公司）；提取分离用试剂均为分析纯；制备HPLC用乙腈为色谱纯（美国TEDIA试剂公司），水为重蒸水。
马肾果叶于2012年采自云南，经中国中医科学院中药研究所张启伟教授鉴定为米仔兰属植物马肾果A. testicularis的叶。
2 提取分离
取马肾果叶10 kg，粉碎，用甲醇提取3次。提取液减压浓缩后，用硅藻土（800 g）吸附，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇回流，减压回收溶剂，分别得到石油醚部位15 g、氯仿部位90 g、乙酸乙酯部位64 g、甲醇部位72 g。氯仿部位首先经硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到Fr1～Fr7共7个组分。每个组分进一步利用Sephadex LH-20（甲醇-水）、制备型高效液相色谱等技术进行分离纯化，从马肾果叶的氯仿部位得到化合物1（35 mg），2（16 mg），3（22 mg），4（37 mg），5（9 mg），6（41 mg），7（28 mg）。
3 结构鉴定
化合物1 白色粉末，ESI-MS m/z 339 [M+Na]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：7.53（2H，m，H-5″，9″），7.50（1H，d，J=15.0 Hz，H-3″），7.35（3H，m，H-6″～ 8″），6.55（1H，d，J=15.0 Hz，H-2″），6.30（1H，m，H-3），4.20（2H，m，H-4），3.28（4H，m，H-1′，4′），1.80（3H，s，H-5），1.55（4H，m，H-2′，3′）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：172.4（C-1），168.9（C-1″），142.0（C-3″），136.7（C-4″），136.0（C-3），133.5（C-2），131.1（C-7″），130.5（C-6″，8″），129.1（C-5″，9″），122.2（C-2″），59.9（C-4），40.7（C-1′），38.6（C-4′），28.2（C-2′，3′），13.2（C-5）。以上数据与文献[8]报道数据基本一致，鉴定化合物1为dasyclamide。
化合物2 白色粉末，ESI-MS m/z 317 [M+H]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：7.70（1H，d，J=14.4 Hz，H-3），7.61（1H，d，J=15.0 Hz，H-3″），7.48（2H，m，H-5″，9″），7.32（3H，m，H-6″～8″），6.92（1H，d，J=15.0 Hz，H-2″），6.15（1H，t，J=7.0 Hz，H-2′），5.71（1H，d，J=14.4 Hz，H-2），3.55（1H，m，H-5′a），3.36（1H，m，H-5′b），2.29（3H，s，SCH3），2.14（1H，m，H-3′a），1.96（1H，m，H-3′b），1.91（2H，m，H-4′）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：167.0（C-1″），164.3（C-1），144.5（C-3），144.1（C-3″），135.6（C-4″），130.9（CH，C-7″），129.6（CH，C-6″，8″），129.0（C-5″，9″），118.8（C-2″），116.3（C-2），63.9（C-2′），47.1（C-5′），35.3（C-3′），22.7（C-4′），15.6（SCH3）。以上数据与文献[9]报道数据基本一致，鉴定化合物2为aglamide A。
化合物3 白色粉末，ESI-MS m/z 355 [M+Na]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：8.12（1H，d，J=14.4 Hz，H-3），8.05（1H，d，J=15.0 Hz，H-3″），7.72（2H，m，H-5″，9″ ），7.57（1H，d，J=15.0 Hz，H-2″），7.25（3H，m，H-6″～8″），7.16（1H，d，J = 14.4 Hz，H-2），6.50（1H，br t，J=7.0 Hz，H-2′），3.71（1H，m，H-5′a），3.55（1H，m，H-5′b），2.42（3H，s，OSCH3），2.11（1H，m，H-3′a），1.94（1H，m，H-3′b），1.79（1H，m，H-4′a），1.66（1H，m，H-4′b）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：165.7（C-1″），162.5（C-1），149.8（C-3），142.3（C-3″），136.4（C-4″），130.1（CH，C-7″），129.5（CH，C-6″，8″），128.8（C-5″，9″），128.5（C-2），120.7（C-2″），64.0（C-2′），46.9（C-5′），40.0（C-3′），35.1（SCH3），22.5（C-4′）。以上数据与文献[9]报道数据基本一致，鉴定化合物3为aglamide B。
化合物4 白色粉末，ESI-MS m/z 301 [M+H]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：7.71（1H，d，J=15.6 Hz，H-3″），7.57（2H，m，H-5″，9″），7.37（3H，m，H-6″～8″），6.98（1H，d，J=15.6 Hz，H-2″），6.15（1H，br t，J=7.2 Hz，H-2′），3.56（1H，m，H-5′a），3.39（1H，m，H-5′b），2.26～2.13（4H，m，H-2，3，3′a），1.95（1H，m，H-3′b），1.48（2H，m，H-4′），0.98（3H，d，J=6.0 Hz，H-4），0.91（3H，d，J=6.0 Hz，H-5）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：172.0（C-1），165.9（C-1″），143.2（C-3″），134.8（C-4″），130.2（C-7″），131.1（C-6″，8″），128.5（C-5″，9″），118.0（C-2″），62.9（C-2′），46.1（C-5′），45.9（C-2），34.5（C-3′），26.3（C-3），22.6（C-4），22.5（C-5），21.6（C-4′）。以上数据与文献[9]报道数据基本一致，鉴定化合物4为aglamide C。
化合物5 白色粉末，ESI-MS m/z 254 [M+Na]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：7.66（2H，m，H-5′，9′），7.53（1H，d，J=15.0 Hz，H-3′），7.42（3H，m，H-6′～8′），6.90（1H，d，J=15.0Hz，H-2′），5.38（1H，br s，H-2），3.53（1H，m，H-5′a），3.31（1H，m，H-5′b），3.28（3H，s，OCH3），2.05（1H，m，H-3′a），1.97（1H，m，H-4′a），1.85（2H，m，H-3′b，4′b）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：166.9（C-1′），142.8（C-3′），135.5（C-4′），131.2（C-7′），129.8（C-6′，8′），129.0（C-5′，9′），119.9（C-2′），89.1（C-2），54.7（OCH3），46.8（C-5），31.2（C-3），21.5（C-4）。以上数据与文献[9]报道数据基本一致，鉴定化合物5为aglamide D。
化合物6 白色粉末，ESI-MS m/z 584 [M+Na]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：7.07（2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′），7.05-7.01（3H，m，H-3″～5″），6.88（2H，br d，J=7.2 Hz，H-2″，6″），6.61（2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′），6.27（1H，s，H-5），6.01（1H，d，J=5.4 Hz，H-1），5.86，5.84（各1H，s，OCH2O），4.60（1H，d，J=13.2 Hz，H-3），4.20（1H，dd，J=13.2，5.4 Hz，H-2），3.94（3H，s，8-OCH3），3.67（3H，s，4′-OCH3），3.30（3H，s，NCH3），2.86（3H，s，NCH3），1.91（3H，s，COCH3）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：169.5（COCH3），167.3（CON），158.3（C-4′），154.5（C-4a），151.7（C-6），140.3（C-8），137.4（C-1″），129.3（C-7），128.7（CH，C-2′，6′），127.5（C-1′），127.4（C-2″，6″），127.0（C-3″，5″），126.1（C-4″），112.6（C-3′，5′），109.0（C-8a），101.3（OCH2O），101.1（C-3a），93.1（C-8b），87.4（C-5），77.5（C-1），59.4（8-OCH3），56.2（C-3），55.0（4′-OCH3），47.4（C-2），37.0（NCH3），35.6（NCH3），20.9（CH3CO）。以上数据与文献[10]报道数据基本一致，鉴定化合物6为aglaroxin A 1-O-acetate。
化合物7 白色粉末，ESI-MS m/z 614 [M+Na]+。1H-NMR（DMSO，500 MHz）δ：7.09～7.01（3H，m，H-3″～5″），6.92（2H，d，J=7.2 Hz，H-2″，6″），6.87（1H，dd，J=8.4，1.8 Hz，H-6′），6.70（1H，d，J=8.4 Hz，H-5′），6.58（1H，J=1.8 Hz，H-2′），6.31（1H，s，H-5），6.03（1H，d，J=5.4 Hz，H-1），5.85，5.87（各1H，s，OCH2O），4.65（1H，d，J=13.8 Hz，H-3），4.16（1H，dd，J=13.8 Hz，J=5.4 Hz，H-2），4.02（3H，s，8-OCH3），3.71（3H，s，4′-OCH3），3.63（3H，s，3′-OCH3），3.35（3H，s，NCH3），2.89（3H，s，NCH3），1.95（3H，s，COCH3）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：169.5（COCH3），167.3（CON），154.1（C-4a），151.5（C-6），148.0（C-4′），147.7（C-3′），140.1（C-8），137.4（C-1″），129.2（C-7），127.9（C-3″，5″），127.5（C-2″，6″），127.4（C-1′），126.3（C-4″），119.9（C-6′），111.5（C-2′），109.7（C-5′），109.0（C-8a），101.1（C-3a），101.1（OCH2O），93.3（C-8b），87.3（C-5），77.5（C-1），59.3（8-OCH3），56.1（C-3），55.5（3′-OCH3），55.2（4′-OCH3），47.5（C-2），37.0（NCH3），35.5（NCH3），21.0（CH3CO）。以上数据与文献[10]报道数据基本一致，鉴定化合物7为3′-methoxyaglaroxin A 1-O-acetate。
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Chemical constituents from leaves of Aglaia testicularis
CHEN Feng-ying， ZHAO Meng-dan*
（Women′s Hospital School of Medicine Zhejiang University， Hangzhou 310006， China）
[Abstract] To study the chemical constituents from the leaves of Aglaia testicularis. The methanol extract was isolated and purified by silica gel， Sephadex LH-20 and preparative HPLC. Their chemical structures were elucidated by MS and spectral data（1H， 13C-NMR）. Seven compounds were isolated from the leaves and identified as dasyclamide（1）， aglamide A（2）， aglamide B（3）， aglamide C（4）， aglamide D（5）， aglaroxin A 1-O-acetate（6）， and 3′-methoxyaglaroxin A 1-O-acetate（7）. All compounds were isolated from this plant for the first time.
[Key words] Aglaia； Aglaia testicularis； chemical constituents
doi：10.4268/cjcmm20132023
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