山豆根鲜切晒干品中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定

材料

1.1 仪器 LC-20AT型高效液相色谱仪;PL402-L电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司];BGZ-146型电热鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司）;研磨机（A11 basic 广州仪科实验室技术有限公司）;电热恒温水浴锅（DZKW型 永光明医疗仪器厂）;超声仪（KQ-350东莞市科桥超声波设备有限公司）。

1.2 材料 苦参碱（中国药品生物制品检定所，批号：110805-201709）、氧化苦参碱（中国药品生物制品检定所，批号：11078-201508）;甲醇（AR，批号：20171219，国药集团化学试剂有限公司）、磷酸（分析级，有效期：2020/10/31，默克股份兩合公司）、乙腈（色谱纯，有效期：2020/08/31，默克股份两合公司）、三氯甲烷（AR，批号：160613，西陇化工股份有限公司）、氨水（AR，批号：2015-1-06，天津市风船化学试剂科技有限公司）、异丙醇（AR，批号：20180415，广东光华科技股份有限公司），水为超纯水;实验用3年生鲜山豆根4种不同干燥加工品编号及样品依次为，1号样：山豆根药材鲜切2 mm烘干;2号样：山豆根药材鲜切2 mm晒干;3号样：山豆根药材鲜切5 mm晒干;4号样：山豆根药材鲜品整根晒干。药材样品均来源于云南省文山州西畴县，经中国科学院昆明植物研究所标本馆刘恩德教授鉴定为豆科植物越南槐（Sophora tonkinensis Gagnep.）的干燥根及根茎。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：氨基柱（4.6×250 mm，5μm）;流动相：乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液（80：5：15）;流速：1.0 mL·min-1，检测波长：210 nm，柱温：32℃。

2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取苦参碱、氧化苦参碱对照品各适量，加流动相制成每l mL含苦参碱18.76 μg，氧化苦参碱147.17 μg的混合溶液。

2.3 供试品干燥加工及供试品溶液的制备

2.3.1 鲜山豆根4种干燥加工品的制备 1号样：现采鲜山豆根药材，快速水冲洗并快速晾干表面水分，横切片厚2 mm，50℃，24h烘干，粉碎，过4号筛，备用;2号样：现采鲜山豆根药材，快速水冲洗并快速晾干表面水分，横切片厚2 mm，晒干，粉碎，过4号筛，备用;3号样：鲜山豆根药材，快速水冲洗并快速晾干表面水分，横切片厚5 mm，晒干，粉碎，过4号筛，备用;4号样：鲜山豆根药材，快速水冲洗并快速晾干表面水分，整根晒干，粉碎，过4号筛，备用。 2号样、3号样和4号样均于每天晴朗天气的上午9：00统一放于室外晒场晾晒，下午5：00统一收回。

2.3.2 鲜山豆根4种干燥加工品溶液的制备 分别取鲜山豆根4种干燥加工品粉碎，各取适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（40：10：1）混合溶液50 mL，密塞，称定重量，放置30 min，超声处理30 min，再称定重量，用三氯甲烷-甲醇-氨水（40：10：1）混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，分别精密吸取续滤液10 mL于蒸发皿内，置水浴锅上至干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜过滤，取续滤液，备用。

2.4 鲜山豆根3种鲜切干燥加工品的性状 鲜切2 mm烘干、鲜切2 mm晒干以及鲜切5 mm晒干鲜品均呈呈不规则的类圆形厚片，外表皮棕色至棕褐色，切面皮部淡棕色，木部淡黄色。有豆腥气，味极苦。外观性状与药典法所得切片基本一致。

2.5 鲜山豆根4种干燥加工品的干燥失重测定 分别平行取鲜山豆根4种干燥加工品的粉末各2份适量，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，开启瓶盖在100-105℃干燥5 h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30 min，精密称定，再在上述温度干燥1 h，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5 mg为止。根据减失的重量，分别计算每份供試品中干燥失重量（%），结果见表1。

2.6 样品含量测定 分别取鲜山豆根4种干燥加工品粉末（过4号筛），按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进样测定，分别计算鲜山豆根4种干燥加工品中Mat和Omt的含量，结果见表2。鲜山豆根干燥加工品第3-2供试品溶液的HPLC色谱图见图1。

由表2可知，鲜山豆根4种干燥加工品Mat含量由高到低依次为鲜品整根晒干>鲜切2 mm烘干>鲜切5 mm晒干>鲜切2 mm晒干;Omt含量由高到低依次为鲜切2 mm烘干>鲜品整根晒干>鲜切5 mm晒干>鲜切2 mm晒干;Mat和Omt总碱由高到低依次为鲜切2 mm烘干>鲜品整根晒干>鲜切5 mm晒干>鲜切2 mm晒干，鲜山豆根4种干燥加工品的Mat、Omt含量以及二者总碱有显著差异。

3 讨论

山豆根临床使用广泛。其主要活性成分苦参碱和氧化苦参碱，是其主要药效物质基础。如何进行科学合理、简便可行、经济有效的干燥加工炮制，有效保存主要活性成分苦参碱和氧化苦参碱，提供安全有效的山豆根中药饮片，是山豆根干燥加工应进一步解决的问题之一。

基于本次鲜山豆根4种干燥加工品中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定结果，虽然鲜山豆根整根晒干的苦参碱和氧化苦参碱总碱最高，但其还需进一步加工为饮片才能使用，加工有可能使总碱含量再进一步下降，还会增加加工成本。

鲜切2 mm烘干与鲜切5 mm晒干的总碱含量较为接近，鲜切5 mm的总碱较为接近整根晒干的总碱含量，切制加工成本低于鲜切2 mm烘干和晒干，较为可行;鲜切2 mm烘干与鲜品整根晒干的总碱含量较为接近，但烘干成本和切制成本较高。基于以上实验结果，从保证疗效、节约成本、节省劳力、易于识别、提升商品形象以及树立道地药材产区标志等方面综合考虑，笔者认为采用鲜山豆根鲜切5 mm晒干的干燥加工方法不失为简便易行和经济有效的新方法。

参考文献：

[1]黄宫绣，本草求真[M].北京：中国中医药出版社，2008，339.

[2]丁佩兰.山豆根和苦参化学成分的比较研究[D].上海：复旦大学，2004：187.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社，2015：26.

[4]江海燕，莫缓恒.山豆根酒制品中苦参碱含量比较[J].广西中医学院学报，1997，16（3）：103-104.