摘 要：本文主要就鸡球虫病疫苗相关研究进展进行综述。
关键词：鸡球虫病；疫苗；研究现状；展望
中图分类号：S852.4 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2017）05-0026-03
鸡球虫病是由孢子虫纲艾美尔科艾美尔属的7种球虫寄生于鸡肠道中引起的一种原虫病，多以柔嫩艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫这些毒力较强的虫株为主，且多危害15～50日龄的雏鸡，发病率和病死率较高[1]，给养禽业常带来巨大经济损失。长期以来，鸡球虫病主要以药物防治为主，常用药物有磺胺二甲基嘧啶、磺胺喹噁啉、百球清等，但防治过程中耐药虫株的出现、药物残留以及治疗成本增加等诸多问题使药物防治受到很大限制。因此，研制安全有效、低毒环保的抗球虫疫苗成为有效防制本病的关键策略和措施。目前已研制成功并应用于生产实践的鸡球虫病的疫苗主要有活疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗、重组卡介苗和佐剂疫苗等。本文主要对鸡球虫病防制中常见疫苗的相关研究进行综述。
1 活疫苗
抗球虫病活疫苗，其免疫机制是通过鸡食入经小剂量球虫卵囊免疫的健康鸡的排泄物或食入被该排泄物污染的垫料后，从而产生对鸡较高的免疫保护力，主要包括强毒疫苗和弱毒疫苗。
1.1 强毒疫苗
鸡球虫病强毒疫苗是以饱和食盐水漂浮法收集自然发病病鸡体内或粪便中球虫卵囊，采用单卵囊分离法分离并增殖各种艾美耳球虫卵囊，并按一定的比例混合后配以适当的稳定剂[3]组成的强毒活疫苗。鸡感染球虫卵囊后在体内繁殖，新的卵囊被排出体外，鸡通过啄食可获得再次免疫，可产生较好的免疫保护作用[4]。但强毒疫苗由于毒力较强，可能将强毒球虫引入鸡场，易诱发球虫病，加之球虫卵囊在水中迅速沉降造成免疫不均匀[5]，因此在实际使用中具有一定的潜在风险和局限性。
1.2 弱毒疫苗
鸡球虫病弱毒疫苗是用鸡胚传代、早熟选育、理化处理等人工方法，将毒力较强的鸡艾美耳球虫的毒力致弱，使其毒性减弱或丧失，但同时保持其良好的免疫原性激发鸡体特异性免疫。
1.2.1 鸡胚传代
鸡胚传代法是以人工方法脱囊后产生的孢子感染鸡胚，繁殖后形成更多的后代卵囊，该卵囊孢子化后经多次传代可形成能在鸡胚中生长的球虫“鸡胚适应株”，具有良好的免疫原性[6]。
1.2.2 早熟选育
早熟选育即筛选亲代虫株反复传代后最早成熟的卵囊早熟株，该早熟株具有发育周期短、致病力低、同时保留良好的免疫原性等特征，从而对动物达到免疫保护作用。
1.2.3 理化处理
即通过加热、冷却、超声波、辐射、化学诱变、X射线等理化方法处理球虫卵囊，使其毒力充分致弱同时保留其较强免疫原性，基于此原理可制成减毒弱毒疫苗。
2 核酸疫苗
核酸疫苗即DNA疫苗。该疫苗将编码球虫抗原的外源性基因插入到真核表达载体上以构建重组质粒，该重组质粒经分离纯化后免疫动物，使具有免疫原性的蛋白抗原基因在动物体内直接表达而使动物获得免疫保护力。因真核表达蛋白产物更接近其天然构象，能够实现正确折叠而被免疫系统正确识别，从而达到对动物机体的免疫保护作用[7]。已报道的球虫抗原基因主要包括柔嫩艾美耳球虫（E. tenella）的基因GX3262、Et7b2、Etl A1和裂殖子表面基因λMZp5-7等，主要为相关虫种孢子表面抗原及裂殖子阶段表达蛋白。DNA疫苗主要有折光体蛋白核酸疫苗、Hsp核酸疫苗、TA4蛋白核酸疫苗、λMzp5-7基因核酸疫苗[5]、微线蛋白核酸疫苗等。
3 亚单位疫苗
亚单位疫苗是利用DNA重组技术，将编码鸡球虫保护性抗原的基因导入受体菌或细胞，使其在受体中高效表达，同时分泌保护性抗原肽链。提取保护性抗原肽链，加入佐剂后即制成的[8]对鸡具有一定免疫保护作用的疫苗。即运用基因工程学原理，将控制球虫毒力的基因敲除或破坏，使其毒力致弱或丧失，只保留其免疫原性制成的疫苗。目前已经研制成功并用于生产的亚单位疫苗有母源亚单位疫苗、重组亚单位疫苗、基因工程亚单位疫苗等。
4 活载体疫苗
用物理、化学、基因工程等方法使载体病毒或细菌毒力减弱后，将外源目的基因插入已有的病毒及细菌载体或其疫苗株基因组及质粒的某些部位使之高效表达后制成的疫苗为活载体疫苗。目前市售的活载体疫苗主要有重组细菌活载体球虫疫苗、重组病毒活载体球虫疫苗、减毒沙门氏菌活载体疫苗、乳酸菌载体疫苗、枯草芽孢杆菌载体疫苗和重组卡介苗。已有研究表明，活载体疫苗能够使外源性目的基因在其内高效表达，具有有效刺激鸡体B淋巴细胞、T淋巴细胞的活化和增殖，有效激发动物体液免疫和细胞免疫效应，对动物形成较强免疫保护力[9]。
5 佐剂疫苗
油佐剂、细胞因子、中草药提取物、某些微生物及其代谢产物可作为免疫佐剂，佐剂的使用具有非特异性增强机体特异性免疫应答，增强抗原的免疫原性的作用。油佐剂疫苗、细胞因子疫苗、代谢产物疫苗应运而生，在养禽生产中大量推广使用。
6 转基因疫苗
转基因疫苗在鸡球虫病疫苗方面的研究鲜见报道。有学者利用基因重组技术，将 E. tenella作为疫苗载体表达外源抗原基因，建立起一套稳定的体内转染体系，获得2个 E. tenella转基因株。通过比较母本株和转基因株感染肉鸡后观察排出卵囊数量发现，转基因株卵囊数量明显减少，由此推之，转基因株免疫鸡可产生较好的免疫保护效果。
综上，人们在基本明确鸡球虫的免疫原性、宿主免疫应答机制的基础上，在抗球虫疫苗研发及应用推广方面已取得了一定成效，这为养禽生产中鸡球虫病的防制提供强有力的保障，新技术的运用，新型疫苗的研制开发也将成为抗鸡球虫病疫苗研发领域的关键和焦点。随着人们对现代分子生物学技术研究的不断深入以及球虫体外培养、各种鸡球虫基因组了解的不断深化，鸡球虫病各类疫苗的优势将会逐渐凸显，这也为鸡球虫病的免疫预防提供有力保障，最大限度降低生产实践中本病的发生，提高养殖户经济效益，对更好的服务当地经济社会发展具有重要作用。□□
参考文献：
[1] 夏艳勋，王涛主编. 动物寄生虫病防治[M].北京：中国农业大学出版社，2008.226.
[2] 刘红霞等. 鸡球虫疫苗的研究进展[J]. 当代畜牧，2014，（1）：59.
[3] 周作勇，聂奎.鸡球虫疫苗的研究进展[J]. 黑龙江畜牧医，2006，（7）：23-25.
[4] 牛艺儒，李玉娥，孙子龙，等.鸡球虫病的免疫防治[J]. 家禽科学，2006，（1）：46～48.
[5] 黄金贵，李运娜，等.鸡球虫病疫苗的研究进展[J]. 中国生物制品学杂志，2011，8（24）：983.
[6] 李仁良，谭志坚，林瑞庆，等.鸡球虫病弱毒疫苗的免疫机理及研究进展[J].中国畜牧兽医，2010，37（2）：132-134.
[7] 宋鸿雁等.鸡球虫DNA疫苗研究进展[J].畜牧与兽医，2011，43（8）：95.
[8] 赵蕾等.鸡球虫疫苗研究现状[J]. 动物医学進展，2011，32（8）：98-103.
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