【摘 要】目的：建立食品中富马酸二甲酯（DMF）的毛细管气相色谱测定的方法。方法：样品通过粉碎均质、溶剂溶解、超声提取、离心除脂、浓缩定容后用毛细管气相色谱（FID）检测。结果：方法的最低检出限为：线性范围：10-200mg/ml；相关系数：R=0.9999；相对标准偏差RSD为0.01%-1.64%；回收率为91.07%-94.7%。结论：方法操作简便，快速，回收率高，精密度好。可应用于食品中富马酸二甲酯含量的快速测定。
【关键词】食品；富马酸二甲酯；气相色谱法
【中图分类号】S816 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）05-0186-02
检测食品中的DMF的方法一般有液相色谱法、气相色谱法和气质联用法。气相色谱仪的普及更利于气相色谱法的推广。但文献中气相色谱法测定的适用的对象往往是无脂或低脂食品，而对高脂食品由于随溶剂提出的脂肪较多，若不能有效去除，常会污染进样口和色谱柱，给仪器带来损害；或者因为样品中基质杂峰和背景干扰影响结果的准确性；或者因为方法选择的提取液毒性较高，对实验操作人员的危害较大。所以对高脂食品中的脂肪提取方法需要进一步研究。
本课题对文献中气相色谱法提取方法的和仪器条件进行优化研究，运用绿色化学的理念，尽量从使用溶剂少、毒性低，提取简单、对实验人员危害少的角度进行研究，可简单地提取DMF并分离脂肪，对色谱条件进行了改进，建立了食品中富马酸二甲酯（DMF）的检测方法。该方法操作简便，快速，测定灵敏，结果稳定，可以运用于食品中DMF残留量的检测。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1 仪器 岛津GC-2010气相色谱仪附带火焰离子化检测器（FID）；30m×0.25mm×0.25µm HP-FFAP弹性石英毛细管柱；Biotage定量浓缩仪；离心机；
1.1.2 试剂 富马酸二甲酯（DMF）标准品购自德国Dr.Ehremstorfer GmbH 公司，纯度：99%；乙腈、正己烷均为色谱纯。
1.2 标准溶液的配制
标准储备液：准确称取0.0100g DMF标准品，用乙腈溶解并定容至10mL，此溶液浓度为1000 mg/ mL。
标准使用液：分别吸取标准储备液0.1、0.2、0.5、1、2mL、4 mL至6个10mL量瓶中，加乙腈至刻度。该标准使用液每1mL当于含DMF10、20、50、100、200mg、400 mg。
1.3 实验方法
1.3.1 仪器条件
色谱柱： 30m×0.25mm×0.25µm HP-FFAP弹性石英毛细管柱；进样口温度：200℃；色谱柱温：起始温度100℃以20℃/min升至200℃；FID温度：220℃；分流比：20：1；柱流量：1.0mL/min；氮气流速：30.0 mL /m in；氢气流速：47mL/min；空气流速：400mL/min。
1.3.2 样品前处理
将样品粉碎均匀，称取5.0 g于50mL塞比色管中，加20.0mL乙腈涡轮振荡均匀，超声振荡30min， 冷藏4 小时，离心分层，取上层液10mL氮吹至近1mL，加乙腈清洗并转移至10mL离心管中，定容至2mL，然后加2mL正己烷除脂，涡轮振荡均匀，离心分层，下层乙腈液供分析用。
1.3.3 样品测定
进样6次1μL 标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度DMF 的色谱峰，以浓度为横坐标，相应的峰面积值为纵坐标，绘出标准曲线；将处理好的样品1μL进气相色谱测定，已标准保留时间定性，根据峰面积，于标准曲线得出样品中DMF的浓度。
2 结果与讨论
2.1 样品前处理方法的改进
DMF能溶于多种有机溶剂，文献中有用三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈等多种溶剂，但三氯甲烷、二氯甲烷等毒性太大，故本研究没有采用。我们用方法：取5.0 g粉碎样品于50mL塞比色管中，加5g中性氧化铝，乙酸乙酯溶解，涡轮振荡均匀，超声振荡30min，离心，于冰箱过夜后过滤，氮吹至1mL进样测定。和本方法1.3.2进行比较不论是实验步骤、除脂效果还是回收率，本方法都有比较大的优势。
2.2 标准曲线的绘制、线性范围和检出限
2.3 方法的精密度和回收率
3 小结
3.1 色谱图
在上述测定条件取1µl10mg/ml标准使用液进色谱仪测定得到以下色谱图，见如下图1
图1 DMF标准色谱图
3.2 标准曲线
以6个浓度水平的标准
3.3 灵敏度
本法考虑到了仪器有不稳定性，采用了将1mg/ml的DMF标准溶液稀释100倍后的标准溶液进行色谱分析，得到一个可靠的噪声值RN，并利用公式求出最低检出浓度Cmin为
其中
RN =Rmax-Rmin
=188-139
=49
H标=11144.2
C标=0.01mg/ml
因此最低检出浓度Cmin=0.4µg/ml，所以根据结果计算公式可计算出本法的DMF最低检测浓度为1.6mg/kg。
3.4 精密度和回收率
向样品中分别加入高、中、低三个浓度的DMF标准物质，相当于25mg/kg、5mg/kg及100mg/kg水平，按照前处理的方法处理后进气相色谱仪测定。每个浓度水平下做6次平行测定的加标回收率，并同时测定相对标准偏差（RSD%），由表1可得平均回收率为，%～%范围内，RSD在%～%范围。结果见下表2在本实验条件下取一系列浓度的标准液分别进行了6次测定，计算变异系数RSD，结果见表1
注：标准加入量和测得值的单位都为mg/kg
4 结论
本论文研究气相色谱法测定食品中富马酸二甲酯（DMF）的条件，建立测定食品中DMF的方法。通过标准曲线，灵敏度实验、精密度实验、加标回收率实验、溶剂选择实验、中性氧化铝用量实验、除脂条件实验论证所采用的仪器条件、测定条件，前处理步骤具有可行性。线性范围10-200mg/ml，R=0.9999本法最低检出浓度0.4µg/mL，，RSD为0.01%-1.64%，回收率为91.07%-94.7%。本方法的灵敏度和精密度、方法检出限和线性范围等指标符合分析的需要，适合应用于食品中富马酸二甲酯残留量的分析。
参考文献：
[1] 刘万山，李青，杨大鹏，等.富马酸二甲酯食品中残留检测方法的研究进展[J].中国卫生工程学，2007，6（4）：250-252.
[2] 张扬，张伟强.薄层色谱法检测富马酸二甲酯方法探讨[J].中国卫生检验杂志，2001，11（6）：722-722.
[3] 金良正，胡浩军.高脂糕点中富马酸二甲酯的气相色谱法测定[J].中国卫生检验杂志，2006，16（10）：1209 -1214.
[4] 陈明，梁春穗.广式月饼富马酸二甲酯残留量测定方法[J].中国卫生检验杂志，2001，11（13）：48-48.
[5] 胡冬生.气相色谱法测定食品中富马酸二甲酯[J].食品科学，2002，23（3）：113-114.
[6] 刘达雄，将卓勤.超声波提取-高效液相色谱法测定月饼中的富马酸二甲酯[J].海峡预防医学杂志，2006，12（2）51-52.
[7] 刘升一，苏柯.高效液相色谱法测定防霉剂富马酸二甲酯[J].色谱，1998，11（2）：180-181.
[8] 何小青，罗关中，蓝波，等.高效液相色谱法测定食品中富马酸二甲酯[J].光谱实验室，2004，21（4）：701-704.
[9] 罗晓燕，刘莉治，李晓东，等. 高效液相色谱法测定食品中脱氢乙酸钠[J].中国卫生检验杂志，2003，13（3）：301-302.
[10] 张娟.高效液相色谱法测定糕点中富马酸二甲酯[J].中国卫生检验杂志，2008，18（8）：1559-1560.
[11] 刘义，朱显琴，邱宏，等.高效液相色谱法同时测定食品中的糖精钠､苯甲酸､山梨酸､富马酸二甲酯和脱氢乙酸钠[J].中国卫生检验杂志，2009，19（3）：582-583.
[12] 刘义，谭建兵，王正虹，等.高效液相色谱法测定糕点中富马酸二甲酯[J].预防医学情报杂志，2009，25（5）：466-468.
[13] 冯楠，路勇，吴颖，等.超高液相色谱法测定皮革样品中富马酸二甲酯[J].中国卫生检验杂志，2009，19（8）：1801-1803.
[14] 阚周密，林建阳，王戏丹.气象色谱法-质谱联用法测定食品中富马酸二甲酯的含量[J].食品科学，2007，28（1）：247-249.
[15] 曹华娟，冯家力，潘振球，等.食品中富马酸二甲酯残留量的气相色谱-质谱联用法测定[J].实用预防医学，2005，12（1）：173-174.
推荐访问： 毛细管 测定 气相 甲酯 快速